** Facultad de Medicina
Instituto de Investigación en Medicina y Ciencias de la Salud

  Año 2014

  Proyecto:   Actividad in vitro de clindamicina-ketoconazol sobre biopelículas de Candida spp de origen urogenital y sobre biopelículas de contenido del tracto genital inferior vaginal normal y con infecciones endógenas.


Investigadores

Resumen

Farinati, Alicia Esther
Marques, Melina Daiana
Orsini, Adrián Oscar
Souto, Agustina
Villanueva, Ruben
Semeschenko, Daniyil
Santalucía, Martín

Influencia de la clindamicina sobre el exopolímero de biopelículas  de Candida spp en la combinación de  clindamicina-ketoconazolAE  Farinati, D Semeshchenko, M Marques, M Santalucía Facultad de Medicina , USAL, Argentina
Candida spp elabora biopelículas (BP) y su formación es un proceso complejo que requiere que las células fúngicas establezcan múltiples interacciones con el medio. Los exopolímeros(EPM)  que rodean a las BP pueden restringir  la actividad de anticuerpos,  la   difusión de sustancias  y unirse a los antimicrobianos (AM), limitando su acción. Los antimicóticos (AMC)  pueden tener dificultades para llegar a las células dentro del EPM. La presencia de moléculas que provoquen su inhibición anulando los inductores del EPM o por otro mecanismo, permitirá la actividad del AM específico. Objetivo: demostrar que la actividad dual de clindamicina-ketoconazol actúa sobre BP de Candida  albicans (CA) y especies no albicans de Candida (CNA)Materiales y métodos: estudiamos la actividad de clindamicina-ketoconazol (CK)  sobre la adherencia y dispersión de BP de 8 aislamientos vaginales de CA y  7 de CNA.  Se inocularon en  3 tubos con caldo Sabouraud y un dispositivo de vidrio para la formación de la BP según técnica ya descrita.Adherencia: Se incubaron 6 horas y se agregó una combinación de CK proveniente del material de óvulos, diluido convenientemente (62.5/260.4 ug/ml), a uno de los tubos de cada aislamiento tomándose como hora 0. Dispersión: esa misma dilución se agregó a otro tubo a  las 16 horas. El tercer tubo quedó como testigo sin antimicrobianos. La lectura se efectuó con microscopio óptico  a las 24 horas de agregada la combinación CK previa tinción con cristal violeta  y se evaluaron con programas fotográficos.  Resultados. Adherencia se demostró poca influencia de CK en la adherencia con respecto a cada testigo. Dispersión: la influencia de CK se demostró en la mayoría de los aislamientos  particularmente en los de CNA que mostraron una mayor presencia de EPS. Las hifas sólo se observaron en 1/15 de los aislamientos de Candida spp  cuando se agregó CK a las 16 horas.Conclusiones: según estos resultados el uso de una combinación de CK  en BP de Candida spp, resulta en una adecuada penetración del AMC demostrada por la dispersión de la BP al cabo de 24 horas. Clindamicina no interfiere con la acción del ketoconazol sino que promovería su actividad anti-candida  modificando posiblemente estructuras  de superficie y la del  EPM por inhibición de las moléculas que facilitan la expresión del mismo. In vivo promueve la actividad inmunomoduladora que no se puede demostrar con este modelo in vitro. Su uso combinado en fórmulas duales facilita la actividad sobre Candida spp actuando como inhibidora o modificadora de las BP aunque lógicamente no ejerza actividad antimicrobiana en este tipo de BP.

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Palabras claves: 

Clindamicina; ketoconazol; biopelículas

Candidiasis vulvovaginal

vaginosis bacteriana.