-Desarrollo, estudio y análisis de Indicadores conductuales e indicadores fisiológicos.

-Desarrollo en laboratorio de indicadores bioquímicos asociados al estrés, con una metodología no invasiva.

Hipótesis: Existen diferencias en los indicadores de estrés propuestos (indicadores conductuales, fisiológicos  y bioquímicos)  en relación con diversos manejos

Materiales y Métodos

Se trabajó con el rodeo bovino presente en las instalaciones del CICVyA del INTA Castelar.

Se realizaron varias tomas de sangre de los animales, en las mangas provistas para tal fin y también se tomaron muestras de materia fecal de los mismos animales, 24 hs después de la toma de sangre.

Se determinó el nivel de cortisol en sangre utilizando un ELISA comercial y se realizó la extracción de metabolitos de cortisol en materia fecal congelada y fresca, utilizando dos protocolos, a partir de alcoholes.

Protocolos utilizados:

-Materia fecal fresca o seca en metanol 80% (Palme, et al, 2005; Mostl and Palme, 2002)

-Materia fecal liofilizada, calentada en etanol (Young et al, 2004)

Se registraron:

Parámetros fisiológicos: temperatura corporal (TºC), utilizando un termómetro digital; frecuencia cardíaca (FC), utilizando un fonendoscopio;  frecuencia respiratoria (FR), a través de la observación de movimientos torácicos;

Variables bioquímicas: glucosa, medida con un medidor de glucosa en sangre con tiras reactivas comerciales; Creatin-kinasa  (CK) por un kit comercial (CPK, Wiener Lab.); Proteínas totales determinadas por un refractómetro clínico; Cortisol plasmático  por método enzimático comercial (Cortisol KAPDB 270, Dia Source Immunoassay SA, Belgium).

Variables hematológica:  Recuento de glóbulos blancos (totales y diferenciales) diluyendo la sangre extraída con EDTA, 1:20 en una solución stock de 1% de Violeta de Genciana y 4% de ácido acético glacial. El conteo se realizó en Cámara de Neubauer; Hematocrito (HTO), mediante el método de microhematocrito.

Las mismas variables bioquímicas y hematológicas se evaluaron en una planta de faena de cerdos, tomando muestras de sangre en el momento del degüello, post-insensibilización.

Resultados

En el rodeo bovino  hemos podido observar una respuesta al estrés de muestro leve, atribuible al nivel de habituación de los bovinos a los procedimientos de manejo y muestreo, medido en términos fisiológicos y hematológicos.

Dada la falta de financiamiento, no se han podido realizar las determinaciones enzimáticas, CK y cortisol en sangre. Las muestras de suero y plasma se encuentran almacenadas a -20°C esperando su procesamiento.

Con los protocolos utilizados, no se ha podido detectar la presencia de metabolitos del cortisol en materia fecal, utilizando el conjugado incluido en el ELISA comercial. 

En cerdos, hemos podido observar  una alteración de los valores bioquímicos y hematológicos (elevación de glucemia, proteínas totales, y recuento de glóbulos blancos), descriptos para la especie en el momento peri-faena. Estos valores fueron significativamente mayores en cerdos que provenían de granjas conocidas por su maltrato a los animales de producción (comunicación personal dueño del frigorífico). Ver tabla.

Comentarios varios

Sabemos que la metodología utilizando los parámetros fisiológicos, bioquímicos y hematológicos se puede aplicar a los animales de producción para evaluar el bienestar animal. Debemos sumar a estas variables, la medición de parámetros comportamentales, poniendo a punto una metodología objetiva que permita identificar los comportamientos más representativos de alteración de confort o diestres, en cada especie.  Se debe seguir trabajando para lograr la extracción de metabolitos de cortisol en materia fecal y detectar su presencia utilizando materia fecal marcada previamente con cortisol (trabajado actualmente por investigadores del ITA Castelar).

Durante el desarrollo del proyecto se han realizado articulaciones de I+D con el  Instituto de tecnología de los Alimentos, CIA-INTA Castelar, con el Depto de Química Biológica de la Fac de Cs Exactas y Naturales de la UBA (FCEN-UBA), con  SENASA y otras facultades nacionales para el desarrollo del curso de transportistas de ganado y trabajo en playas de faena.

Se han presentado parte de los resultados en varias reuniones destinadas a productores y público en general y también en congresos específicos del tema (Jornadas de IPCVA, Congreso AAPA).

Dada la incapacidad financiera del proyecto para la compra de reactivos y kits de determinaciones enzimáticas en el exterior, no se podido cumplir con todos los objetivos del proyecto.

Es por esto, que se ha reformulado el trabajo de investigación para la nueva cartera de proyectos 2015, poniendo énfasis en mediciones sencillas y observaciones de comportamiento animal y su respuesta al estrés.

Si bien no fueron actividades propias del proyecto, pero si del Area de Bienestar Animal, durante el 2014 se ha elevado, a través de la Dra Liliana Pagliere, para su consideración ante las máximas autoridades de la USAL, el "Programa de Estudios Internacionales Agropecuarios", para desarrollar junto a estudiantes y graduados veterinarios de universidades de Estados Unidos (USA) y Perú, tareas de desarrollo social y productivo, en comunidades campesinas de Peru. En el marco de esta presentación, en Julio del 2014 viajó una estudiante de último año de la carrera de Cs Veterinarias (financiada con fondos personales), y realizó una pasantía en Nuñoa, al sur del Cusco. Esta capacitación e intercambio estudiantil, se presentó como una posibilidad de PFO para aquellos alumnos orientados hacia la producción animal y el desarrollo y compromiso social.

Bibliografía consultada

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Anexo I

-Congresos

Cómo estimar en el frigorífico la calidad de manejo en granja y transporte?. Langman, L., Cunzolo, S., Paschetta, F., Sancho, A.M. y Marcoppido, G. Congreso AAPA, Corrientes, Octubre 2013. Poster.

Resumen: La faena de cerdos trae aparejado situaciones estresantes para el animal, que repercuten en la calidad final del producto.  En este ensayo se intento cuantificar el estrés sufrido por los animales durante el transporte de la granja a la planta de faena,  el tiempo de espera pre-noqueo y la relación de estas variables con la calidad final de la carne madurada.

-Cursos y talleres brindados

·       Bienestar en la Producción Animal. Universidad Nacional de Jujuy, UNJU, 14 de noviembre del 2013.

·       Bienestar en Animales de Producción. Facultad de Ciencias Veterinarias de la UBA, Bs As, 15 de oct 2013.

·       Seminario "Punto final en animales de experimentación: como trazar el límite?". CICVyA-INTA Castelar. 9 de octubre 2013.

·       Jornada de Investigación: "Estudio de parámetros asociados a estres en animales de producción: Ensayo preliminar de seguimiento del manejo en granjas de porcinos" USAL-Pilar, Agosto 2013.

·       Taller "Programa de mejoramiento en rodeos alpaqueros del Perú". Centro Cultural Nuñoa, Nuñoa, Perú. 9 de juio 2013.

·       "El bienestar de los animales de granja utilizados en investigación". Disertante. EEA INTA Balcarce. Mayo 2013.

Resultados preliminares presentados en:

·       Propuesta de Proyecto para participar en los Premios SENASA a la "Investigación, transferencia y comunicación" Octubre de 2013

"Bienestar Animal: diagnóstico y plan de mejora en plantas de faena de las principales especies productivas"

·       Propuesta de Proyecto presentada a Premios ArgenINTA 2014.

"Bienestar animal en plantas de faena. Evaluación e identificación de falencias en la calidad de manejo propias y de las etapas previas de la cadena"