Investigadores

Resumen

Mestorino, Olga Nora
Lucas, Mariana Florencia
Benzaquen, Mauricio
Lucas, María Victoria
Martinelli, Fabiana
Carreño, Miriam
Castro, Sergio

La mastitis bovina es uno de los principales problemas para la industria lechera mundial. Los defectos en la calidad de la leche atentan contra la salud pública y afectan económicamente a todos los eslabones de la cadena productiva.Prototheca zopfii  y Prototheca wickerhamii son algas sin clorofila capaces de afectar tanto a los animales como al hombre (zoonosis). Provocan mastitis bovina de origen ambiental que puede contagiarse entre las vacas durante el ordeñe. Son infecciones poco frecuentes pero cuando suceden las mastitis son clínicas-agudas que se convierten en crónicas-persistentes. Provocan una marcada disminución en la producción láctea y la reducción del tamaño de las glándulas mamarias afectadas.El control de la mastitis por Prototheca spp. es complejo pues estas algas resisten el tratamiento con antimicrobianos convencionales. Hasta el momento, la identificación de las vacas infectadas y su sacrificio o eliminación del rodeo son los únicos métodos conocidos para controlar esta enfermedad. El hallazgo de un antimicrobiano capaz de combatir este tipo de mastitis es un aporte importante a la medicina veterinaria y a la producción láctea.

Los objetivos del proyecto son:1) A partir de vacas mastíticas de un establecimiento que tiene un promedio de 3500 vacas en ordeñe obtener aislamientos de Prototheca spp. 2) Evaluar la susceptibilidad de los aislamientos frente a un menú de antimicrobianos por el método de difusión en gel de agar. Los antimicrobianos propuestos en el plan fueron: Fosfomicina, Bacitracina, Vancomicina, Penicilina, Oxacilina, Amoxicilina/ Ácido Clavulánico, Cefalexina, Ceftiofur, Imipenem, Aztreonam, Polimixina (colistina), Gentamicina, Kanamicina, Tetraciclina, Eritromicina, Azitromicina, Tilosina, Cloranfenicol, Clindamicina, Enrofloxacina, Rifampicina, Sulfametoxazol/Trimetoprima, Metronidazol Itraconazol, Anfotericina B y Nistatina.        En el período que comprende este informe se obtuvieron 24 aislamientos de Prototheca zopfii provenientes de vacas y 5 provenientes de leche de los tanques de frío de algunos de los tambos del establecimiento. Para realizar el diagnóstico, las muestras de leche se tomaron a partir de vacas con mastitis clínica resistente al tratamiento con antimicrobianos. Antes del muestreo, las vacas recibieron 2 tratamientos. El primer tratamiento consistía en 3 jeringas intramamarias con Espiramicina-Neomicina-Prednisolona aplicadas cada 12 horas más un período de espera posterior de 8 ordeñes (4 días). El segundo tratamiento tenía el mismo protocolo más 3 administraciones intramusculares de Tilosina al % y a razón de  mg/Kg cada 24 horas. Luego de un período de espera de 8 ordeñes (4 días) las vacas permanecieron en el rodeo hospital durante 28 ordeñes (14 días) sin tratamiento antibiótico con el objetivo de evitar residuos antibióticos que afecten el diagnóstico. Las muestras se tomaron luego del despunte y antes del ordeñe de acuerdo a los procedimientos descriptos por el National Mastitis Council y en el término de 24 h las muestras refrigeradas arribaron al laboratorio de diagnóstico. Las muestras fueron sembradas en agar sangre bovina al 7% utilizando un anza calibrada de 10 mL. Las placas fueron incubadas a 37°C durante 48-72 horas. El diagnóstico de Prototheca spp. se realizó mediante el reconocimiento morfológico de las colonias y observación microscópica de las algas teñidas con azul de metileno y la identificación de la especie se realizó mediante la prueba de susceptibilidad a clotrimazol que permite diferenciar entre Prototheca zopfii y Prototheca wickerhamii (Casal & Gutierrez, 1981; Greene, 2006).Los aislamientos fueron sometidas a una prueba de susceptibilidad in vitro de acuerdo al método de difusión en agar (Bauer et al, 1966) y se utilizarán los siguientes discos de antibiograma: Anfotericina B, Gentamicina (250 mg y 10 mg), Kanamicina (500 mg), Amoxicilina/ Ácido Clavulánico (20-10 mg), Azitromicina (15 mg), Cloranfenicol (30 mg), Penicilina (10 mg), Tetraciclina (30 mg), Fosfomicina (200 mg), Rifampicina (5 mg), Vancomicina (30 mg), Bacitracina (40 mg), Cefalexina (30 mg), Metronidazol (16 mg), Colistina (150 mg), Enrofloxacia,  Oxacilina (1 mg) , Clindamicina (2 mg), Itraconazol, Nistatina, Aztreonam (30 mg), Trimetoprim-Sulfametoxazol (1,25-23,7 mg), Imipenem (10 mg), Cefacetril-Rifaximina (30-40 mg), Clotrimazol (50 mg). Hasta el momento, solo se hallaron aislamientos sensibles frente a los siguientes discos:  Anfotericina B, Kanamicina, Gentamicina, Colistina, y Nistatina. A partir de los resultados preliminares podemos concluir que existen antimicrobianos que, formulados correctamente, podrían ser efectivos para el tratamiento de la mastitis bovina por Prototheca zopfii. Futuros estudios de susceptibilidad cuantitativa (determinación de concentraciones inhibitorias mínimas) y el estudio de las curvas de muerte podrán enriquecer nuestros hallazgos.

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Palabras claves: 

Prototheca spp

Mastitis bovina

Antibiograma